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UV1901PC紫外分光光度計法測定熒光增白劑的熒光強度（二苯乙烯三嗪）

熒光增白劑的主要質量指標熒光強度（或稱白度）是一種相對的的純度指標，它是指試樣的活性成分與同一結構的標準樣品活性成份的相對比值。熒光強度的測定方法有染色法、紫外法和熒光法等。目前我國生產或使用單位大多采用染色法，這是一種間接的測定方法，即使一系列選定濃度的標樣與定量的試樣在特定的條件下染至棉紗、棉布或紙張上，然后對比被染物（目測或用白度計測量）而確定試樣的熒光強度。

UV1901PC紫外分光光度計法測定二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的熒光強度的原理

二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的分子可以有順式和反式兩種異構體，而該類熒光增白劑在光照后能反射熒光，是由于處于同一平面的反式異構體中，二笨乙烯共軛體系的π電子云重疊的結果。順式異構體分子中，由于相鄰基團的空間的空間位阻，其分子不得處于同一平面，從而二笨乙烯共軛體系被破壞，故不能反射熒光，因此，二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的活性成份就是它的反式異構體。

該化合物的紫外（吸收）光譜在270豪微米和349豪微米呈現(xiàn)明顯的吸收，其中349豪微米的吸收處相應于反式二笨乙烯分子的共軛體系，而270豪微米的吸收是苯胺基團的吸收峰，因此，順式異構體的紫外光譜不呈現(xiàn)349豪微米的吸收，所以，當熒光增白劑的熒光強度降低即反式異構體的含量減少時，其紫外光譜的349毫微米吸收峰強度就要下降。不同強度的試樣同一濃度水溶液的紫外光譜，顯然，熒光強度越高，349毫微米的吸光度越大。

  將10-60毫克/升試樣水溶液的紫外光譜中349毫微米吸光度對濃度作圖得一通過原點的直線，符合比爾定律。

以349毫微米的比吸收系數(shù)作為定量分析的依據(jù)。從試樣349毫微米的比吸收系數(shù)K與標樣在同一波長的比吸收系數(shù)K，即可求出試樣的熒光強度S。

如果先從K 計算出單位熒光強度的比吸收系數(shù)K

則將K與K相比，即可直接讀出試樣的熒光強度。

實驗儀器：

UV1901PC紫外可見分光光度計或UV1902PC紫外分光光度計二選一即可

試劑 熒光增白劑

標樣：符合標準HG2-382-66熒光強度130

操作步驟：稱取一定量的樣品，在容量瓶中配成1000毫升水溶液，再用移液管吸移10毫升該溶液至1000毫升水溶液，再用移液管吸移100毫升容量瓶中，加水至刻度。配得的溶液應避光放置，在5分鐘內于349毫微米處測量溶液的吸光度E，然后從濃度C（毫克/升）和吸收池厚度L（厘米），計算出比吸收系數(shù)K（升/毫克.厘米），K=E/CL.

  光照時間對測量結果的影響：二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的反式異構體，在紫外線照射下，分子中的苯環(huán)會發(fā)生旋轉，易購成順式結構，熒光增白劑溶液的濃度越稀異構化越易發(fā)生。

因此，當熒光增白劑試樣的溶液暴露在日光下時，它的熒光強度隨著照射時間的增加而下降，

當2條曲線是同一個熒光增白劑溶液在剛配制好以及在一般光線下防置了15分鐘后的兩個紫外光譜，可見15分鐘后，349毫微米的吸光度明顯下降了。

不同濃度的熒光增白劑試樣溶液在一般光線下放置及避光放置后349毫微米吸光度隨時間變化的情況。說明了避光放置時，在20分鐘內吸光度幾乎不變。在一般光線下放置5分鐘后，吸光度即下降2.5-1.3%。試樣溶度較高時，變化幅度較小。

溫度對測量結果的影響：將同一濃度不同溫度的試樣溶液進行紫外測量，溫度的影響為：溫度升高1度，吸光度（349毫微米）遞增（0.46±0.06%）

樣品重復測定實驗：

取樣品按操作步驟重復測定6次，從測得的比吸收系數(shù)求出樣品的熒光強度S

計算其標準偏差及變異系數(shù)，結果表明，本方法測定樣品重現(xiàn)性，度較好。

結果討論

光照時間和溫度對測量結果的影響較大，實驗數(shù)據(jù)說明，如按操作步驟要求，試樣溶液配制好以后避光放置，并在5分鐘內進行測量，可消除光照的影響，而試樣溶液的濃度稍大一些更好，根據(jù)使用紫外分光光度計時所要求的吸光度范圍，以25毫克/升左右為宜。在實踐中，先測定幾個溫度的標樣比吸收系數(shù)K，然后根據(jù)試樣溶液的溫度，選擇相近溫度的K進行計算。

紫外可見分光光度計法不耗用棉布，直接測量試樣溶液，測定一個樣品僅需10分鐘，而染色法除需要耗用棉布（約0.5米/噸）外，分析一次樣品需3-4小時。因此，用紫外分光光度計法測定熒光增白劑的熒光強度，用以分析工業(yè)產品，控制生產，確是一個快速、簡便的方法，度較高，值得推廣。